在我国,抗生素类物质在化妆品检测中属于禁止添加组分。当然考虑到一些化妆品的生产条件存在禁用物质不可避免产生的情况,《化妆品安全技术规范》中对于抗生素类物质也设定了最低检出限、定量下限等规定,涉及的抗生素种类主要有盐酸美满霉素、甲硝唑、二水土霉素、盐酸四环素、盐酸金霉素、盐酸多西环素和氯霉素共7种组分。详细规定如下:
其实抗生素除了以上几种外,盐酸米诺环素、盐酸土霉素、林可霉素、克林霉素也常用于化妆品中。抗生素一般存在在祛痘除螨类产品,如各种祛痘洁面乳,激白抗痘骨胶原精华面膜,抗痘美白洁面乳,粉刺王精华等。所以对于这些化妆品抗生素检测,我们法一般都推荐采用高效液相色谱法。当然,高效液相色谱法也有很多注意事项,下面我们就几项重点注意问题,为大家分析一下。
一、样品抗生素分离
我们在制备样品时,第一项面对的问题就是将抗生素进行分离。通常我们会使用甲醇(3.1)+盐酸(3.4)(1+1)的混合溶液与样品进行振摇、超声提取分离。我们在做这一步时,有时溶解稀释样品用流动相中的草酸盐会干扰第一个色谱峰的检测。 所以我们需要进行流动相梯度洗脱,才能实现抗生素物质及溶剂中草酸盐的有效分离。林可霉素和克林霉素检测时,我们可以选择颗粒度更新磷酸盐,进行检测。
二、基质干扰问题
化妆品的形态有固液之分,通常液体基质的化妆品容易进行样品处理,回收率效果也好。但是类似洗面乳、凝胶类的基质的化妆品,因为体积不容易定容,而且这些产品通常表面活性剂太多,会导致加样回收率试验中,样品对加入的标准物质保留时间向后迁移,影响测试准确性。这时,就需要我们选择有机相比例较高的流动相,洗脱较长时间才能恢复到最初的保留时间。在此,推荐四氢呋喃、石油醚等物质,可以去除化妆品大多机制的干扰,保持保留时间恒定及较高回收率。
三、选择检测波长
不同种类的抗生素吸收波长特征也有所不同。氯霉素在278nm波长处有特征吸收,盐酸四环素、多西环素、盐酸米诺环素、盐酸金霉素、土霉素均有三个较大紫外吸收峰,包括在268nm波长处有特征吸收,甲硝唑在240、320nm波长处有特征吸收,林可霉素和克林霉素选择末端吸收
210nm为检测波长。综合考虑,在210nm波长处测定林可霉素和克林霉素,其余物质在268nm波长处测定。
高效液相色谱法对于测定化妆品中抗生素类组分,具有样品前处理操作简便,回收率高,色谱峰重现性好,分离速度快,能较好地应用于化妆品的检测检验工作。我们已经采用该方法进行了几百件检品的测定,结果令人满意。通常主要检出项为甲硝唑和氯霉素,说明该类物质需要严格加以控制和监测。