检测微生物的方法有很多,但是今天,拜恩检测为大家介绍一种快速检测微生物的方法,那就是使用微生物快速检测片。生物快速检测片内含培养基非纺织品制成,是一种相对与传统的平板培养方法更为方便、快速而且可定量检测微生物如细菌总数、大肠菌群、霉菌和酵母菌、金黄色葡萄球菌、沙门氏菌等的微生物培养纸片。
一、快速检测微生物需要的仪器
实验室天平
均质器或类似仪器
旋涡或类似仪器
1000ul的微量加样器
容量为15—20ml的无菌反应试管(样品稀释用)
恒温培养箱(35℃/95℉min)
棉签
二、快速检测微生物需要的试剂
0.9%的无菌生理盐水
三、快速检测微生物注意事项
用过的检测片用高压锅或沸水灭菌处理后再废弃。
培养层样品层覆盖膜
弄赃或被污染的检测片应该被废弃。
四、快速检测微生物样品处理
食品样品
称取25g(或20g)的食品样品置入无菌袋内
加225ml(或180ml)0.9%的无菌生理盐水
均质1.5分钟
按10倍稀释,至少4个梯度(用0.9%的无菌生理盐水)
如污染程度较高,按10倍稀释,至少6个梯度(用0.9%的无菌生理盐水)
五、快速检测微生物测试步骤
①用剪刀沿横向边压封线外侧剪开锡箔袋。
②取出需要数量的检测片,将不用的检测片立即放回原锡箔袋中,重新密封,于2--8℃(34--46℉)保存,不要冷冻。
③回温30min,同时在覆盖膜上写好样品名,稀释倍数等需求的特征。
④打开透明的覆盖膜,在某些试验中可彻底的拿开覆盖膜,此覆盖膜要在无菌环境下保存好。
⑤接种样品后,用保存的覆盖膜重新覆盖检测片,当样品溶液立即被吸收时不需等待,立即用覆盖膜覆盖。
⑥在相应的条件下(见下表)培养。
六、快速检测微生物不同状况下检测片的使用
①食品样品
用微量加样器吸取1ml的样品溶液接种到检测片上。
②湿片法
在检测片上接种1ml0.9%的无菌生理盐水,让检测片吸收10—30分钟,用检测片的样品层擦拭样品检测表面或在样品表面压。
③干片法
用检测片的样品层擦拭样品检测表面或在样品表面压。用微量加样器吸取1ml的无菌生理盐水接种到检测片上。
④棉签测试样品
在检测片上接种1ml0.9%的无菌生理盐水,让检测片吸收30分钟。用无菌棉签擦拭样品表面
用接种后的棉签在检测片样品层表面充分擦拭。或者把接种后的棉签放到称有10ml0.9%的无菌生理盐水的试管里,然后在接种1ml的盐水到检测片上。
⑤薄膜过滤
接种0.8ml无菌生理盐水到检测片的样品层。用薄膜过滤样品后,将薄膜盖到检测片上。
⑥空气微生物样品
使检测片的样品层暴露在环境中30分钟。在检测片上接种1ml0.9%的无菌生理盐水。掀起上层覆盖膜,用接种匙在样品层挑起菌落可做进一步的鉴定。
七、快速检测微生物结果评定
在培养后数明显的菌落数即为结果。